Подагра является наиболее распространенной воспалительной артропатией метаболического происхождения, характеризующейся интенсивным воспалением, механизмы развития которого неизвестны.

Данное исследование проведено с целью оценки уровня окислительного стресса в фибробластоподобных синовиоцитах (ФПС) после воздействия кристаллов моноурата натрия (МУН), которые вызывают воспалительную реакцию.

ФПС человека, выделенные из эксплантатов синовиальной оболочки, были выдержаны с кристаллами МУН (75 мкг/мл) на протяжении 24 ч. Затем проводилась оценка жизнеспособности клеток путем окрашивания кристаллическим фиолетовым, апоптоза путем окрашивания аннексином V и клеточного содержимого активных форм кислорода (АФК) и активных форм азота (АФА) (O2 -, H2O2, NO) методами цитометрии с анализом изображений и флуориметрии. С целью определения уровня окисления белков изучалось содержание белковых карбонилов методом оксиблоттинга, а с помощью трансмиссионной электронной микроскопии были проанализированы изменения клеток на ультраструктурном уровне.

Жизнеспособность ФПС, выдержанных с кристаллами МУН, снизилась на 30 % (p < 0,05), а интенсивность апоптоза возросла на 42 % (p = 0,01). В ФПС, стимулированных кристаллами МУН, было определено повышение содержания H2O2 в 2,1 раза и содержания O2- и NO в 1,5 раза. При оценке методом оксиблоттинга было установлено, что пятна, соответствующие лизатам белков ФПС, стимулированных кристаллами МУН, проявляли иммунореактивность к белковым карбонилам, что указывает на присутствие окислительно модифицированных белков. Одновременно кристаллы МУН вызывали изменения морфологической структуры ФПС в форме утолщений и нарушения целостности эндоплазматической сети, образования вакуолей и неправильно свернутых гликопротеинов.

В ходе исследования было определено, что кристаллы МУН способствуют высвобождению АФК и АФА в ФПС, что ведет к окислению белков, изменению окислительного статуса эндоплазматической сети и в конечном итоге к апоптозу ФПС.